Изделия из пластика для ПЦР-исследований. Пцр лаборатории требования

Содержание:

Изделия из пластика для ПЦР-исследований

МИКРОПРОБИРКИ от 0,2 до 5 мл

Центрифужные микропробирки типа Эппендорф с крышками SafeSeal на петле объемами 0.5, 1.5 и 2.0 мл традиционно используются для рутинных задач в молекулярно-биологических лабораториях, в т.ч. для пробоподготовки ПЦР. Микропробирки имеют на крышке специальный защелкивающийся «замочек», предотвращающий случайное открывание микропробирки во время центрифугирования, термостатирования, транспортировки и хранения образцов.

Микропробирки поставляются либо нестерильные с сертификатом качества «PCR Perfomance Tested», либо стерильные с сертификатом качества «Biosphere ® plus». Для работы с образцами больших объемов поставляются микропробирки объемом 5.0 мл с сертификатом качества «PCR Perfomance Tested».

Для работы с образцами белков и ДНК малых объемов или с низкими концентрациями используются микропробирки (объемами 0.5, 1.5 и 2.0 мл) со специально модифицированной поверхностью, обеспечивающей минимальную сорбцию белков или ДНК на стенках пробирки (Protein или DNA Low Binding).

Полипропиленовые микропробирки с резьбовыми крышками с уплотнительным кольцом (O-ring) характеризуются повышенной герметичностью. Они используются в качестве центрифужных пробирок (выдерживают ускорение до 20000 g), при транспортировке и долговременном хранении образцов при низких температурах (до -86 о С). Микропробирки поставляются стандартных объемов (0.5, 1.5 и 2.0 мл), с или без «юбки» устойчивости, с крышками на петле, нестерильные с сертификатом качества «PCR Perfomance Tested», либо стерильные с сертификатом качества «Biosphere ® plus».

Тонкостенные полипропиленовые пробирки объемом 0.2 и 0.5 мл идеально подходят для проведения ПЦР исследований. Встроенный в крышку антиконтаминационный щиток предотвращает возможное загрязнение образца при случайном контакте с внутренней поверхностью крышки при открывании пробирки. Доступны как бесцветные микропробирки, так и микс разных цветов, нестерильные с сертификатом качества «PCR Perfomance Tested», либо стерильные с сертификатом качества «Biosphere ® plus» (только бесцветные).

Также компания Sarstedt предлагает стрипованные микропробирки по 4 и 8 штук в стрипе объемами 0.1 мл с низким профилем и 0.2 мл с обычным и низким профилями. Поставляются бесцветные, белые (для количественных исследований ПЦР в режиме «реального времени»), а также смесь разных цветов, нестерильные с сертификатом качества «PCR Perfomance Tested», либо стерильные с сертификатом качества «Biosphere ® plus» (только стрипованные микропробирки из 4-х штук объемом 0.2 мл).

Двухкомпонентная разборная cистема штативов RackSystem предназначена для раскапывания и хранения образцов при работе как с отдельными, так и стрипованными микропробирками объемом 0,2 мл, а также ПЦР планшетами. Удобный 96-ти луночный формат совместим со всеми типами современного оборудования. Возможность установки штативов друг на друга обеспечивает экономию пространства при хранении образцов.

Для подготовки, остановки ПЦР-реакции, транспортировки и хранения образцов компания Sarstedt предлагает штативы IsoFreeze ® Rack. Охлаждающий гель внутри штатива дает возможность поддерживать температуру на уровне 4 о С в течение не менее 3-х ч после предварительного охлаждения при температуре -20 о С в течение не более 2-х ч.

Микропробирки объемами 0.1 — 5.0 мл идеально подходят для подготовки, хранения образцов, а также проведения ПЦР исследований. Наряду с одиночными микропробирками компания Sarstedt предлагает стрипованные микропробирки по 4 и 8 штук в стрипе объемами 0.1 и 0.2 мл.

Микропробирки поставляются либо нестерильные с сертификатом качества «PCR Perfomance Tested», либо стерильные с сертификатом качества «Biosphere ® plus».

Планшеты Multiply ® идеально подходят для проведения как классической, так и для количественной ПЦР с детекцией в режиме реального времени (qPCR). Совместимы с наиболее распространенными моделями ДНК-амплификаторов и секвенаторов ведущих производителей.

  • 96-ти или 384-х луночные планшеты.
  • Без «юбки», c «полуюбкой» и с «юбкой».
  • Со стандартным или низким профилем.
  • Изготовлены из полипропилена прозрачного или белого цвета.
  • Подходят для количественных ПЦР исследований с детекцией в режиме реального времени (qPCR).
  • Тонкостенные лунки планшета обеспечивают быструю и гомогенную передачу тепла между термоблоком и образцом.
  • Буквенно-цифровая маркировка черного цвета для легкой идентификации лунок.*
  • Выступающий ободок лунок обеспечивает более эффективную герметизацию и уменьшение риска перекрестной контаминации за счет более плотного прилегания адгезивных пленок.*
  • Для закрывания планшетов могут использоваться термостойкие адгезивные пленки или плоские крышки в стрипах.

*кроме планшетов Multiply ® с присоединенными стрипами.

Компания Sarstedt –ведущий мировой производитель наконечников для дозирования. Работа с наконечниками Sarstedt – гарантия точности и воспроизводимости лабораторных исследований. Наконечники сертифицированы в соответствие с международным стандартом ISO 8655-2. Совместимость наконечников с автоматическими дозаторами различных производителей подтверждается «Декларацией соответствия».

Ассортимент продукции представлен наконечниками с фильтрами/без фильтра и специальными наконечниками для исследований в области молекулярной биологии, имеющих сертификаты качества «PCR Performance Tested» и «Biosphere ® plus». Контроль качества и сертификация продукции проводятся независимой лабораторией.

Стандарт качества «PCR Performance Tested» был специально разработан с учетом особых требований, необходимых для работ с нуклеиновыми кислотами (например, ПЦР, количественная ПЦР, выделение и хранение образцов ДНК/РНК и др.). Продукция стандарта «PCR Perfomance Tested» соответствует следующим требованиям: не содержит ДНК, ДНКаз/ РНКаз и ингибиторов ПЦР.

Стандарт качества «Biosphere ® plus» обеспечивает максимальную защиту от любых возможных загрязнения. Продукция стандарта «Biosphere ® plus» производится в условиях чистой комнаты, а также подвергается дополнительному строго контролируемому процессу удаления примесей, содержание которых значительных ниже значений для стандарта «PCR Performance Tested». Также продукция стандарта «Biosphere ® plus» является апирогенной и не содержит АТФ и эндотоксинов, стерилизована в соответствии с ISO 11135.

Кюветы UV-micro cuvettes

При проведении измерений в ультрафиолетовой области спектра одноразовые пластиковые кюветы Sarstedt являются недорогой альтернативой дорогостоящим кварцевым кюветам. Использование пластиковых одноразовых кювет предотвращает возможную контаминацию, возникающую при промывке кварцевых кювет.

Кюветы UV-micro cuvettes подходит для использования со многими моделями фотометров/спектрофотометров ведущих производителей с длиной оптического пути 10 мм, например, Analytik Jena, Bio-Rad, Eppendorf BioPhotometer и BioSpectrometer, Perkin Elmer, ThermoSpectronic и др. Для удобства работы с разными типами фотометров/спектрофотометров кюветы имеют разную высоту прохождения луча (8.5 и 15 мм).

Кюветы UV-micro cuvettes позволяют проводить измерения ДНК и белков в видимой и ультрафиолетовой областях спектра, используя минимальный объем образца — всего 50 мкл. Изготовленные из специального пластика, обладающего повышенным светопропусканием в УФ диапазоне по сравнению с полистиролом и полиметилметакрилатом, кюветы подходят для измерений при длинах волн от 220 нм в отличие от полистирола (от 330 нм) и полиметилметакрилата (от 300 нм). Прозрачные стенки обеспечивают превосходный визуальный контроль находящейся в кювете жидкости, что позволяет своевременно обнаруживать пузырьки воздуха, которые могут повлиять на результаты эксперимента. Кроме того, воронкообразная конструкция дна кюветы предотвращает капиллярный эффект и гарантирует постоянное нахождение образца даже минимального объема (50 мкл) в центре зоны измерения.

Кюветы поставляются упакованными в пенопластовый штатив по 100 штук в каждом для предотвращения возникновения царапин. Штатив установлен в закрывающуюся коробку для удобного доступа к каждой кювете во время работы и долговременного хранения. Компания Sarstedt предлагает нестерильные кюветы без крышек, а также кюветы, сертифицированные на отсутствие ДНКаз, РНКаз и белков и закрытые индивидуальными крышками.

Нестерильные кюветы без сертификатов качества могут использоваться для стандартных задач для последовательного измерения нескольких образцов, например, при построении калибровочного графика. Сертифицированные кюветы с индивидуальными крышками идеально подходят для работы с образцами, чувствительными к деградации или возможной контаминации, например, образцами РНК. Сертификаты доступны на сайте компании Sarstedt в режиме онлайн.

При проведении измерений в ультрафиолетовой области спектра одноразовые пластиковые кюветы Sarstedt являются недорогой альтернативой дорогостоящим кварцевым кюветам.

Кюветы UV-micro cuvettes позволяют проводить измерения ДНК и белков в видимой и ультрафиолетовой областях спектра, используя минимальный объем образца — всего 50 мкл. Изготовленные из специального пластика, обладающего повышенным светопропусканием в УФ диапазоне по сравнению с полистиролом и полиметил-метакрилатом, кюветы подходят для измерений при длинах волн от 220 нм.

Кюветы поставляются упакованными в пенопластовый штатив по 100 штук. Компания Sarstedt предлагает нестерильные кюветы без крышек, а также кюветы, сертифицированные на отсутствие ДНКаз, РНКаз и белков и закрытые индивидуальными крышками.

Пцр лаборатории требования

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — это один из методов молекулярно-биологической, или ДНК-диагностики. Его суть заключается в обнаружении инфекционного возбудителя в биологическом образце генетического материала (ДНК или РНК).

Исследования проводятся на базе клинико-диагностической лаборатории. Её оборудуют, согласно требованиям, которые предъявляются к данному типу лабораторий.

Например, стандарты оснащения лаборатории, которая работает на базе кожно-венерологического диспансера, утверждены в Приказе Министерства здравоохранения РФ от 15 ноября 20102 г. №924 (приложение №16 к «Порядку оказания медицинской помощи по профилю «дерматовенерология»).

Читайте так же:  Илья Курагин: «Об обысках в «Вятиче» я узнал по дороге в Китай». Отчетность вятич

Исследования в ПЦР лаборатории

В лаборатории проводится широкий спектр исследований. С помощью полимеразной цепной реакции можно выявить вирусные гепатиты B, C, D, G; урогенитальные инфекции; инфекции, которые передаются половым путем (ИППП), папиломмавирусные, TORCH и герпесвирусные инфекции; оппортунистические, гнойно-септические, внутриутробные, кишечные и нейроинфекции; инфекции дыхательного тракта.

ПЦР-диагностика очень эффективна, поскольку позволяет выявить возбудителя инфекции и диагностировать заболевание ещё до его клинических проявлений. При этом исключаются ложные результаты.

Требования к помещению

В лаборатории выделяют рабочие зоны, которые соответствуют этапам ПЦР-анализа:

  • Для приёма, регистрации, разбора и первичной обработки биоматериала. Здесь принимают, сортируют, маркируют и хранят материал.
  • Для выделения ДНК/РНК. Оптимально размещать зону в отдельном помещении, но допускается и размещение в помещениях, где проводят другие исследования (кроме генно-инженерных!). В последнем случае необходимо оборудовать ПЦР-бокс или бокс биологической безопасности, в котором запрещено проводить любые другие методы исследований, кроме ПЦР. Под зону выделяют помещение площадью 15–20 кв. м.
  • Для приготовления реакционных смесей и проведения исследований. Здесь готовят ПЦР-смеси, вносят выделенные препараты ДНК/РНК в пробирку для ПЦР. Оптимальная площадь помещения 15–20 кв. м.
    Этапы выделения ДНК/РНК и приготовления смесей проводят в разных помещениях. Однако допускается совместить их. В таком случае обязательно оборудуют боксы – отдельный для каждого этапа.
  • Для детекции продуктов амплификации. Оптимально размещать зону в отдельном помещении, в котором имеется ПЦР-бокс. Обычно при детекции используют метод электрофореза и гибридизационного анализа. Если необходимо использовать оба метода одновременно, необходимо выделить отдельную зону для проведения гибридизационного анализа. При этом расходные материалы и посуду для каждого метода используют свою. Оптимальная площадь помещения для детекции составляет 25–30 кв. м.
  • Если в лаборатории применяют метод real-time PCR, то не нужно выделять зону детекции.

    Кроме рабочих зон, необходимо выделить и вспомогательные помещения: архива (для хранения документации), комнаты для персонала (отдыха, приёма пищи), раздевалки, кабинета заведующего, склада, санузла.

    При возможности рекомендовано выделить отдельное помещение под автоклавную для обеззараживания исследуемого материала. Если такой возможности нет, то при соблюдении правил биологической безопасности допускается общая с другими подразделениями лаборатории автоклавная.

    Кроме обязательного зонирования, к помещению ПЦР-лаборатории предъявляются такие технические требования: наличие водопровода, канализации, электричества, отопления, освещения (естественного и искусственного), приточно-вытяжной или вытяжной вентиляции, систем кондиционирования и пожаротушения.

    Не допускается воздухообмен между зоной детекции и остальными зонами.

    Внутренняя отделка

    Стены, потолок и пол должны иметь гладкую поверхность без щелей, стыков, трещин, а пол – покрыт антискользящим материалом. Они должны быть устойчивыми к воздействию дезинфицирующих и моющих средств, легко обрабатываться.

    Согласно «Методическим указаниям по применению бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха и поверхности в помещениях», во всех рабочих зонах ПЦР-лаборатории устанавливают бактерицидные лампы из расчёта 2,5 Вт/куб. м.

    Оборудование и мебель

    Согласно Стандарту оснащения молекулярно-биологического подразделения клинико-диагностической лаборатории, необходимо такое оборудование: термостат твердотельный для пробирок типа Эппендорф, аплификатор, насос с колбой-ловушкой, микроцентрифуга для пробирок, центрифуга-встряхиватель (вортекс), настольный бокс для ПЦР, трансиллюминатор, аппарат для проведения горизонтального электрофореза с источником питания, Прибор для чтения результатов исследования на биомикрочипах (ДНК-чипах), камера для гибридизации (для проведения исследований на биомикрочипах), комплект оборудования для проведения исследований методом полимеразной цепной реакции в реальном времени, наборы одно- и восьмиканальных пипеточных дозаторов, холодильники (бытовой и низкотемпературный от –70 до –80 °С).

    Также ПЦР-лабораторию нужно оснастить: системой гель-электрофореза (для отображения результатов) и гель-документации (для их анализа).

    В ПЦР-лаборатории устанавливают медицинскую мебель — рабочие столы, стулья, тумбочки, полки и шкафы (для хранения посуды, материалов и т. д., а также документации).

    Главные требования к медицинской лабораторной мебели — эргономичный дизайн, удобство, долговечность, устойчивость к воздействию химических и других веществ.

    Исследование биологических материалов

    В состав отдела микробиологических исследований ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Оренбургской области» входят: лаборатория бактериологических исследований, лаборатория вирусологических исследований, лаборатория молекулярно-генетических исследований, лаборатория особо-опасных инфекций. В составе отдела трудятся 33 специалиста, из них 14 с высшим образованием. Среди сотрудников 1 кандидат медицинских наук, 1 заслуженный врач России, 1 Почетный работник Роспотребнадзора, 1 лауреат премии губернатора Оренбургской области «Достоинство и милосердие» в номинации «Лучший санитарный врач». 3 сотрудника имеют высшую квалификационную категорию, 24 первую. Работники отдела являются авторами более чем 50 научных публикаций, в том числе 7 авторских свидетельств на изобретения и патентов. Лаборатории отдела входят в состав испытательного лабораторного центра (ИЛЦ), они аккредитованы на техническую компетентность в национальной и международной (DAkkS, Германия) системах аккредитации и соответствуют требованиям стандарта ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025, предъявляемым к испытательным лабораториям. Лаборатории имеют лицензии на медицинскую деятельность и на деятельность, связанную с использованием микроорганизмов II-IV групп потенциальной опасности.

    Лаборатория вирусологических исследований – единственная лаборатория в Оренбургской области, где проводятся исследования по изоляции вирусов от людей и из объектов окружающей среды, является базовой лабораторией Центра экологии и эпидемиологии гриппа ФГБУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского. Лабораторией осуществляются исследования на вирусные гепатиты А, В, С, Д, герпес, ветряную оспу, вирус Эпштейна-Барр, цитомегаловирусную инфекцию, ВИЧ, сифилис, корь, краснуху, эпидемический паротит, клещевой энцефалит, лайм – боррелиоз, лихорадку Западного Нила. Проводятся исследования клещей на вирус клещевого энцефалита. Так же определяется напряженность иммунитета до и после вакцинации к вирусам кори, краснухи, эпидемического паротита, полиомиелита, гепатита В, клещевого энцефалита, гриппа, дифтерии.

    Лаборатория бактериологических исследований проводит все виды бактериологических и паразитологических исследований объектов окружающей среды (воды, воздуха, смывов, пищевых продуктов, почвы и т.д.). Кроме того, осуществляет медицинские услуги по исследованию клинического материала (мочи, крови, раневого отделяемого,фекалий и т.д.). На нашей базе также можно пройти лабораторное обследование для оформления личной медицинской книжки. Лаборатория является единственной в Оренбургской области, где паразитологические исследования проводит врач, имеющий сертификат по специальности «Паразитология».

    Лаборатория особо-опасных инфекций осуществляет бактериологическую диагностику заболеваний II группы потенциальной опасности – сибирской язвы, бруцеллёза, холеры, туляремии.

    Лаборатория молекулярно-генетических исследований проводит выявление ДНК/РНК возбудителей инфекций передающихся половым путём (хламидии, трихоманады, микоплазмы, уреаплазмы и др.), вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска, гепатитов (А, В, С), гриппа А (H1N1, H3N2, H1-swine, H5N1), гриппа В, возбудителей острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ, в том числе коронавирусов, вызывающих тяжелую респираторную инфекцию), внебольничных пневмоний (хламидии, микоплазмы, легионеллы), коклюша, паракоклюша и бронхисептикоза, возбудителей острых кишечных инфекций (шигеллы, сальмонеллы, норо-, астро- и ротавирусы), диарогеныхE.coli, иерсиний,энтеровирусов, выявление комплекса возбудителей клещевых инфекций: клещевого энцефалита, возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов, возбудителей моноцитарного эрлихиоза человека, возбудителя гранулоцитарного анаплазмоза человека, а также определение ГМО в продуктах питания.

    При исследовании клинического материала для идентификации микроорганизмов и определения чувствительности к антибиотикам используется полуавтоматический анализатор Аutoskan4 (Германия).

    Измерительный модуль прибора – это высокочувствительная фотометрическая система на основе многоканальной оптоволоконной оптики. Метод определения имеет высокую специфичность, поскольку в анализаторе реализована уникальная система биотипирования микроорганизмов более чем по 30 реакциям одновременно. Исследования проводят на специальных комбинированных 96-луночных панелях (идентификация + антибиотикорезистентность).

    Лаборатории отдела оснащены современным высокопроизводительным и точным оборудованием. При проведении иммуноферментного анализа используется автоматический анализатор «Эволис Твин Плюс, США». Который представляет собой полностью автоматизированную открытую систему, в которой объединены дозатор образцов, инкубаторы, промывочное устройство, многоканальный фотометр и процессор для обработки данных анализа.. Автоматически производится контроль на всех этапах операции внесения образцов, контролей и реагентов, измерение уровня жидкости в образце, а также детекция сгустков кондуктометрическим методом, что повышает качество проводимых исследований.

    Микроскопия изучаемых объектов проводится с использованием световых методов с захватом и цифровой обработкой изображения (тринокулярный микроскоп, Leika, Германия) и иммунофлюоресцентного окрашивания (микроскопы Micros, Австрия).

    Для ускоренной идентификации пищевых продуктов используется микробиологический анализатор ТЕМРО (БиоМерье, Франция). Для ускоренного исследования клинического материала и объектов окружающей среды используется микробиологический анализатор MiniVidas (БиоМерье, Франция)— мультипараметрический автоматический иммуноанализатор, основанный на технологии ELFA (энзим-связанный иммунофлюоресцентный анализ). Данная технология позволяет определять аналиты с высокой чувствительностью (превышающей на несколько порядков чувствительность ИФА) и позволяет значительно снизить время проведения анализа.

    ПЦР — диагностика является современным, быстрым и точным методом исследования в микробиологии для выявления многих заболеваний. ПЦР — диагностика обнаруживает наличие инфекционных возбудителей в тех

    случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Большая точность метода достигается за счет высокой специфичности ПЦР — диагностики, так как в исследуемом материале выявляется уникальный фрагмент ДНК или РНК, характерный только для данного возбудителя, что прямо говорит о его присутствии в организме

    Имеющееся в оснащении лаборатории оборудование — амплификаторы для проведения ПЦР в режиме реального (Rotor-Gene Q QIAGEN, (Германия), термоциклер с 1000 оптическим реакционным модулем CFX96 (США, ВIORAD laboratories), экстрактор нуклеиновых кислот, NucliSens ЕasyMAG (Нидерланды, Биомерье) позволяет полностью автоматизировать процесс, снизив риск контаминации на всех этапах анализа, сократить время получения результатов исследований, обеспечить их максимальную точность, объективность и достоверность.

    Лаборатории отдела проводят постоянную работу по взаимодействию с Региональными центрами (2), Референс-центрами (8) и Национальными центрами по вопросам мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней (1) .

    460021, г. Оренбург, ул. 60 лет Октября, 2/1, тел. 8 (3532) 70-35-61 ,факс 8 (3532) 33-35-38.

    Памятка при выборе гистологического исследования

    Приём гистологического материала в «ШАНС БИО»

    С февраля наша лаборатория ввела новые требования к приёму гистологического материала, прежде всего это связанно и обоснованно с различными задачами по постановке диагноза и ведения онкопациента.

    ? Код 803 Гистологическое исследование (1 образец), включает одно заключение по материалу, помещаемому в гистологическую кассету. 30?25?6 мм – это максимальный размер того, что можно поместить в кассету и собственно размер самой гистологической кассеты.

    Выглядит это следующим образом:

    Макро: Микро:

    Фото 1. ?4. ГЭ. Папиллома. Весь объем патологически изменённых тканей исследован. Границы удаления оценить легко.

    Макро: Микро:

    Фото 2. ?4. ГЭ. Мягкие ткани живота. Локализованное разрастание, предположительно аденома МЖ.

    Читайте так же:  Психолингвистический эксперимент: требования, условия, методика проведения Текст научной статьи по специальности - Психология. Требования к экспериментатору

    Ткани молочной железы в присланном материале не представлены.

    Видна соединительно-тканная капсула.

    ? Код 814 Гистологическое исследование среднего операционного материала (1-2 фрагмента) включает одно и/или два заключения по материалу, в зависимости от случая и допобработку на два фрагмента исследуемой ткани.

    Например: прислан крупный образец кожи, размером более 6 см с язвенным поражением поверхности. Отобрано два фрагмента тканей; поверхность и толща.

    Макро: Макро:

    Для выявления отдалённых фокусов неоплазии лаборант отдела патоморфологии производит полную ревизию образца тканей.

    Фото 3. ?10. ГЭ. Ороговевающий

    плоскоклеточный рак кожи, высокая степень

    Слева книзу расположен фокус вертикального

    роста или фокус инвазии.

    Фото 4. ?40. ГЭ. Отдалённый метастатический фокус опухолевой ткани. Макроскопически, был расположен в 5 см от первоначального инфильтративно-язвенного поражения, обнаружен «случайно».

    А ведь от этого зависит….

    Клиническая классификация по стадиям (по системе TNM) информация приведена для данного случая неоплазии (ППК)

    Т — первичная опухоль
    Tis — carcinoma in situ
    TI — размеры опухоли до 2,0 см
    Т2 — размеры опухоли более 2,0 см — до 5,0 см
    ТЗ — размеры опухоли более 5,0 см
    Т4 — опухоль любых размеров, прорастающая другие анатомические структуры /V — регионарные лимфатические узлы N0 — регионарных метастазов нет
    Nx — недостаточно данных для оценки регионарных лимфатических узлов
    N I — наличие метастазов в регионарные лимфатические узлы М — отдаленные метастазы
    Мх — недостаточно данных для оценки отдаленных метастазов МО — отдаленных метастазов нет М1 — наличие отдаленных метастазов
    0 стадия Tis N0 МО
    1 Т1 N0 МО
    II Т2-3 N0 МО
    III Т4 N0 МО
    IV ТО N1 МО
    ТО N0-1 Ml
    Т1-4 N1 МО
    T1-N0-1 Ml

    . Обратите внимание , что даже Т2 — размеры опухоли более 2,0 см — до 5,0 см появляются при второй (II) стадии заболевания. В данном случае патпроцесс относится к категории Т4 — опухоль любых размеров, прорастающая другие анатомические структуры. Специалист должен правильно расставлять приоритеты: либо это ранняя диагностика онкологических заболеваний, либо ему просто нужно констатировать факт онкопроцесса.

    ? Код 817 Гистологическое исследование большого операционного материала (2-3 фрагмента), включает одно и/или два и/или три заключения по материалу, в зависимости от случая и допобработку на несколько фрагментов исследуемых тканей.

    При выборе данного кода можно направлять обширные области или даже целые органы и особо крупные фрагменты.

    Напоминаем из анатомии…

    Например: тело матки и оба яичника. Яичник, врастающий в сальник и рог матки. Яичник, сальник и лимфатический узел тазовой полости. Тело матки, шейка матки и лимфатический узел тазовой полости и т.д. в различных комбинациях.

    Фото 5. Х 4. Окраска по Маллори. Матка. Концентрические разрастания лейомиосаркомы виде «глаз». Выраженный эндометриоз и кровенаполненные сосуды «дополняют» картину.

    Например: гряда молочной железы. При этом происходит полная ревизия тканей, отбирается образец опухолевой ткани (первичный очаг), фокальный образец (вторичное разрастание) и лимфатический узел. Или же образец опухолевой ткани (первичный очаг) и оба лимфатических узла. При гистологическом исследовании РМЖ приоритет отдаётся в пользу регионарных лимфатических узлов (рекомендации ВОЗ).

    Ревизия крупных разрастаний….

    Поиск лимфатических узлов…..

    Фото 6. Х 4. ГЭ. Лимфатический узел. Реактивные изменения (I88.9).

    Фото 7. Х 4. Вторичный (метастатический) очаг опухолевой ткани (М-8211\6).

    Фото 8. Х 10. ГЭ. Тубулярная аденокарцинома молочной железы, умеренно дифференцированная (М-8211\3 | G2).

    Мы не принимаем материал, которые не соответствует требованиям лаборатории!

    Несоответствие тары… и размеров. Бутылка с узким горлом….

    «Утрамбованные» образцы «страдают» от отсутствия фиксирующей жидкости! Фактически исследуем некроз. «Тёмное месиво» чаще оказывается множеством фрагментов….

    Код 803 используется для исследования образца тканей с верификацией патпроцесса, т.е. просто информирует врача о диагнозе пациента. И если размер неоплазии позволяет, то описываются границы резекции. Это происходит в случае своевременного обращения за профессиональной помощью владельцев, т.к. условно любая неоплазия изначально это одна клетка, которая начала патологически делиться, и в большинстве случаев размер соответствует требованиям лаборатории.

    Кратко код 803 – DS + границы резекции при соблюдении размерности.

    Код 814 используется для исследования образца тканей не соответствующего требованиям, (3?3?3 см.) и ориентирует врача на дальнейшее ведение онкобольного. Заключение одно или два в зависимости от конкретных тканей и патпроцесса.

    Кратко код 814 – применяем, если визуально это орган и если размер явно больше чем 3?3?3 см; врачу нужен DS и границы.

    Множество вопросов поступило по поводу семенников. Всё-таки это отдельный полноценный орган и для адекватного ведения больного необходима оценка придатка и/или соединительных тканей придатка или капсулы органа (при инвазии). Не всегда неоплазия расположена вблизи выводных каналов придатка, а размеры органа сильно вариабельны…. Иногда приходиться делать несколько образцов тканей.

    Фото 9. ?10. ГЭ. Семенник и придаток. Строение в пределах нормы.

    Кратко код 817 – применяем, если визуально это орган или обширная область, а врачу нужен не только DS, но и понимание патпроцесса. Границы, регионарные л.у. Может быть врач хочет проверить множественные очаги поражения для понимания стадийности заболевания при диссеминации мастоцитомы или лимфом кожи, посмотреть наличие инфильтративного роста в подлежащие и близлежащие структуры. Например, инвазия в кость при плоскоклеточном раке ногтевого ложа и т.д.

    ДОПОЛНЕНИЕ:
    ? Код 805 Дополнительное окрашивание (3 красителя)., добавляется по желанию заказчика к 803 или эндоскопическому материалу (1 локализация, любой отдел) 882.

    Фото 10. ?4. Окраска по Крейбергу. Эндоскопический материал. Назальный полип. Положительное окрашивание альциановым синим, при этом виден муцин, скапливающийся в виде «озёр».

    Кратко: требуется для верификации диагноза при ряде случаев, включающих «сложные» неоплазии, аутоиммунные заболевания и дерматозы и т.д.

    Фото 11. ?10. РАS или окрашивание шифоидной кислотой. Биопсия кожи. Макроскопически узелковое поражение. Аутоиммунное заболевание: красный плоский лишай. Положительная окраска гликозаминогликана (ярко-розовый) в слущенных пластах роговых эпителиоцитов внутри кистозных полостей, скопления белка вблизи пилосебацейного комплекса (слева ярко-розовые гомогенные массы) и яркая окраска отдельных клеток базального и супрабазальных слоев (гранулёз) отдельных сосочков с развитием межсосочкового акантоза . Воспаление не выражено, единичные лейкоциты, расположенные диффузно.

    С Уважением, ветеринарный врач-патоморфолог лаборатории «ШАНС БИО»,

    к.в.н. Заболотная Алена Михайловна

    Биологическая безопасность в диагностических лабораториях медицинских организаций

    Диагностические лаборатории медицинских организаций, как правило, осуществляют работы с патогенными биологическими агентами (ПБА) III–IV групп патогенности. Чтобы обеспечить в лаборатории требования биологической безопасности, необходимо предусмотреть поточность технологических процессов, зонирование производственных помещений, своевременное проведение дезинфекционных мероприятий. Расскажем о том, как это сделать.

    ПБА — это патогенные для человека микроорганизмами и гельминты, а также любые объекты и биологические материалы, подозрительные на их содержание. Классификация микроорганизмов по группам патогенности представлена в СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III–IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».

    Зонирование лаборатории

    Лаборатория должна иметь 2 входа: один — для персонала, второй — для приема биологического материала на исследования. На входных дверях должно быть обозначено название лаборатории и размещен международный знак «Биологическая опасность».

    Производственные помещения лаборатории разделяют на «заразную» и «чистую» зоны (см. схему). В «заразной» зоне выполняют любые виды работ с микроорганизмами и биологическим материалом. «Чистая» зона предназначена для тех видов деятельности, при которых невозможен контакт с патогенными биологическими агентами.

    На границе «чистой» и «заразной» зон лаборатории целесообразно предусмотреть санитарный пропускник.

    Рабочие столы, стеллажи, оборудование в «заразной» зоне маркируют с помощью международного знака «Биологическая опасность». Помещения «заразной» зоны оборудуют бактерицидными облучателями.

    Выносить за пределы лаборатории оборудование, лабораторную или хозяйственную посуду, реактивы, инструменты и прочие объекты можно только после их дезинфекции и с разрешения руководителя лаборатории.

    Требования к отделке помещений лаборатории

    Поверхности пола, стен, потолка, мебели, оборудования и прочих объектов в помещениях лаборатории должны быть гладкими, устойчивыми к влажной уборке с применением моющих и дезинфицирующих средств. Для пола необходимо предусмотреть гидроизоляцию и антискользящее покрытие.

    Батареи отопления в «заразной» зоне располагают на достаточном расстоянии от стен, чтобы обеспечить возможность их дезинфекции.

    Окна и двери помещений «заразной» зоны лаборатории должны быть герметичными, иметь запирающие устройства.

    Если лаборатория располагается на первом этаже или в цоколе, то окна обязательно оснащают металлическими решетками, не нарушающими правил пожарной безопасности. Для защиты рабочих столов от попадания прямого солнечного света используют светозащитную пленку или жалюзи из материалов, устойчивых к воздействию дезсредств.

    Доставка и прием биологического материала

    Биологический материал для исследований в лабораторию должен доставляться в закрытых контейнерах, биксах или в сумках-холодильниках, промаркированных с помощью международного знака «Биологическая опасность».

    На дно контейнера для транспортировки укладывают адсорбирующий материал (марлевую салфетку, ткань, вату).

    Не допускается доставка материала в хозяйственных сумках, чемоданах, портфелях и других предметах личного пользования.

    Чтобы исключить контакт бланков-направлений с биологическим материалом, их вкладывают в отдельный полиэтиленовый пакет.

    Персонал лаборатории должен осуществлять прием и разбор биологического материала с использованием средств индивидуальной защиты: масок и резиновых перчаток.

    Работа с патогенными биологическими агентами

    Во время работы в «заразной» зоне лаборатории следует соблюдать максимальную осторожность и применять средства индивидуальной защиты. При пипетировании необходимо пользоваться резиновыми грушами или автоматическими устройствами.

    Запрещается пипетировать ртом и переливать жидкий инфекционный материал через край пробирки, покидать рабочее место во время манипуляций с ПБА, удалять необеззараженные сгустки крови из пробирок вытряхиванием, сливать жидкие отходы в канализацию без предварительного обеззараживания.

    Работы с ПБА, представляющие наибольшую опасность для медицинского персонала и окружающей среды, должны выполняться в боксированных помещениях «заразной» зоны лаборатории или в боксах биологической безопасности II класса. К таким работам относятся:

  • центрифугирование ПБА и другие манипуляции, вследствие которых образуются аэрозоли;
  • приготовление суспензий;
  • работа с лиофилизированными ПБА;
  • работа по ведению коллекционных штаммов;
  • работа по идентификации и изучению выделенных штаммов микроорганизмов.
  • серологические исследования и ПЦР-исследованияпо детекции в клиническом материале возбудителей парентеральных вирусных гепатитов В и С, ВИЧ-инфекции и других микроорганизмов II группы патогенности.
  • Во время работ двери боксов и предбоксов должны быть закрыты. До момента окончания работ выход из боксов не допускается.

    Читайте так же:  Комментарий к Уголовному кодексу Российской Федерации (научно-практический). Уголовный кодекс особенная часть рф

    Перед началом работ с использованием боксов биологической безопасности включают вентиляцию, проверяют исправность оборудования, наличие аварийного запаса дезинфицирующих средств. Манипуляции с ПБА должны выполняться ближе к задней стенке бокса на поддонах с салфетками, смоченными дезинфицирующим раствором.

    После окончания работ с ПБА переднюю панель бокса биологической безопасности опускают, внутри бокса включают бактерицидные лампы.

    Боксы биологической безопасности должны проверяться на защитную эффективность:

    после монтажа и подготовки к использованию;

    после перемещения или ремонта;

    не реже одного раза в год при наличии фильтров предварительной очистки воздуха от крупнодисперсных частиц;

    не реже 2 раз в год при отсутствии фильтров предварительной очистки воздуха от крупнодисперсных частиц.

    При проверке боксов должны контролироваться параметры эффективности работы фильтров очистки воздуха и скорость воздушного потока в рабочем проеме бокса.

    По окончании работ в «заразной» зоне все объекты, содержащие ПБА, должны быть убраны в холодильники, термостаты или лабораторные шкафы. При наличии коллекции культур микроорганизмов их хранилища опечатываются. Все рабочие поверхности дезинфицируются. Помещения «заразной» зоны лаборатории запираются и опечатываются.

    Дезинфекционные мероприятия в лаборатории

    При организации дезинфекционных мероприятий в лабораториях применяют физические и химические методы дезинфекции.

    Для обеззараживания лабораторной посуды, защитной одежды персонала, бактериологических посевов, а также жидких отходов можно применять паровые стерилизаторы.

    В воздушных стерилизаторах допускается обеззараживать лабораторную посуду из стекла, металлов или силикона, не загрязненную органическими веществами.

    Обратите внимание!

    Параметры паровой и воздушной стерилизации контролируют с помощью максимальных термометров, которые размещаются в контрольных точках. Количество контрольных точек зависит от объема камеры стерилизатора. Параметры паровой стерилизации дополнительно контролируются при помощи мановакуумметров.

    Химический контроль термической стерилизации осуществляют при каждом цикле работы с использованием специальных тест-индикаторов, необходимое количество и точки расположения которых зависят от вида аппаратуры и объема стерилизационной камеры.

    Контроль стерилизации с помощью бактериологических методов (биотестов) должен осуществляться не реже 2 раз в год, а также после ввода в эксплуатацию и ремонта аппаратуры. Биотесты, содержащие некоторое количество жизнеспособных микроорганизмов, обладающих высокой резистентностью, помещают в контрольные точки стерилизационной камеры. При качественно проведенном процессе стерилизации микроорганизмы погибают. Вид применяемых биотестов зависит от типа стерилизационного оборудования.

    Химическими методами проводят обеззараживание различных поверхностей, медицинской мебели, оборудования, жидких отходов, спецодежды и других объектов.

    К сведению

    При выборе химических дезинфектантов предпочтение следует отдавать средствам с широким спектром антимикробной активности.

    Объекты, загрязненные кровью, необходимо дезинфицировать растворами, обладающими активностью в отношении возбудителей парентеральных инфекций.

    Рабочие растворы дезсредств готовят в специально отведенных помещениях или в вытяжном шкафу. Контейнеры (емкости) с растворами маркируют, указывая название дезсредства и его назначение, концентрацию раствора, дату приготовления и дату конечной реализации.

    Дезсредства, применяемые для проведения текущих и генеральных уборок, должны обладать моющими свойствами. Текущую уборку проводят 2 раза в день. Обрабатывают полы, мебель, оборудование, подоконники, двери.

    Генеральные уборки проводят не реже 1 раза в месяц, в боксированных помещениях — не реже 1 раза в неделю.

    Во время генеральных уборок моют и дезинфицируют стены на высоту до 2 м, пол, плинтусы, двери, окна, мебель, аппараты, приборы. Для «чистой» и «грязной» зон используют отдельный уборочный инвентарь, который должен быть промаркирован и использоваться строго по назначению.

    После влажной уборки включают бактерицидные облучатели. Их следует эксплуатировать в соответствии с действующими методическими документами и инструкциями по применению конкретного оборудования.

    Если в течение дня нужно экстренно обработать небольшие по площади или труднодоступные поверхности, следует использовать готовые к применению формы дезсредств, которые имеют небольшое время экспозиции и выпускаются в виде спреев или дезинфицирующих салфеток.

    Медицинские изделия и посуду дезинфицируют способом полного погружения в рабочий раствор дезинфицирующего средства. Разъемные изделия обеззараживают в разобранном виде, каналы и полости изделий заполняют дезинфицирующим раствором.

    Особенности обращения с отходами лабораторий

    Все отходы, образующиеся в «заразной» зоне лаборатории, считаются эпидемиологически опасными, т. е. относятся к классу Б, и должны подвергаться обеззараживанию.

    Твердые отходы, которые образуются в «заразной» зоне лаборатории, собирают в одноразовые пакеты или контейнеры желтого цвета или имеющие желтую маркировку, подвергают дезинфекции химическими или физическими методами.

    Жидкие отходы из «заразной» зоны запрещено сливать в канализационную сеть без предварительного обеззараживания. Чаще всего их смешивают с растворами дезсредств в пропорциях, указанных в инструкциях по применению конкретных дезинфектантов.

    Лабораторную посуду с культурами микроорганизмов, как правило, обеззараживают в паровых стерилизаторах.

    Пробирки со сгустками крови обеззараживают с использованием дезинфицирующих растворов или с применением физических методов дезинфекции. Вытряхивать необеззараженные сгустки крови из пробирок запрещено.

    При погружении в дезинфицирующий раствор пробирок со сгустками крови необходимо соблюдать осторожность. Пробирку берут анатомическим пинцетом так, чтобы одна его бранша вошла немного внутрь, и погружают ее в наклонном положении до полного заполнения раствором. При правильном погружении воздушные пузыри не образуются, пробирка опускается на дно.

    Техника безопасности и ликвидация аварийных ситуаций

    Помещения лаборатории должны быть оборудованы пожарной сигнализацией и обеспечены средствами пожаротушения в соответствии с требованиями пожарной безопасности.

    Сотрудники диагностических лабораторий должны быть обеспечены спецодеждой соответствующего размера: медицинскими халатами и костюмами, шапочками, медицинской обувью и средствами индивидуальной защиты, в том числе перчатками и масками, респираторами.

    Для работы в боксированных помещениях используют отдельный халат, доходящий до нижней трети голени, и тапочки.

    Рабочая одежда и обувь должны быть индивидуальными, храниться отдельно от личной одежды. Смена рабочей одежды проводится по мере загрязнения, но не реже 1 раза в неделю. Стирать спецодежду следует централизованно. Перед сдачей в стирку защитную одежду обеззараживают.

    В лабораториях не допускается применение материалов и средств личной гигиены, раздражающих кожу. После окончания работ с ПБА, при переходе из «заразной» зоны в чистую, а также после уборочных работ и проведения дезинфекции персонал лаборатории должен выполнять гигиеническую обработку рук, используя кожные антисептики.

    Важно!

    На случай аварийных ситуаций, при которых создается угроза выделения ПБА в воздух рабочей зоны или есть риск заражения персонала, в лаборатории должен быть план ликвидации аварии и запас дезинфицирующих средств.

    Объем мероприятий по ликвидации аварии зависит от характера выполняемой работы, вида и свойств ПБА, масштабов аварии.

    Кроме того, в специально отведенном месте хранят аварийную аптечку, гидропульт, комплекты рабочей одежды для переодевания пострадавших и защитной одежды для сотрудников, ликвидирующих последствия аварии. Ответственным за комплектование аптечки и аварийной укладки является заведующий лабораторией.

    Состав аварийной аптечки:

    1. Спирт этиловый 70%-ный — 2 флакона по 100 мл.

    2. Спиртовой раствор йода 5%-ный — 1 флакон.

    3. Раствор борной кислоты 1%-ный — 1 флакон.

    4. Нашатырный спирт — 1 флакон.

    5. Бинт марлевый медицинский стерильный (5 м ? 10 см) — 2 шт.

    6. Лейкопластырь бактерицидный (не менее 1,9 см ? 7,2 см) — 3 шт.

    7. Салфетка марлевая медицинская стерильная (не менее 16 см ? 14 см, № 10) — 1 уп.

    8. Ножницы с закругленными браншами.

    При аварии во время работы на центрифуге крышку медленно открывают только спустя 30–40 минут, чтобы сформировавшийся аэрозоль успел осесть. Центрифужные стаканы и разбитое стекло помещают в дезинфицирующий раствор, поверхность крышки, внутренние части центрифуги, ее наружную поверхность дезинфицируют (после отключения ее от электросети).

    О каждом случае аварийной ситуации руководитель лаборатории обязан сообщить комиссии по контролю соблюдения требований биологической безопасности, а также руководителю медорганизации.

    Не реже 1 раза в год в лаборатории должны проводиться тренировочные учения по ликвидации аварий.

    Допуск персонала к работе с ПБА

    Допуск персонала к работе с ПБА III–IV групп патогенности, а также допуск инженерно-технического персонала к обслуживанию лабораторного оборудования должен осуществляться на основании приказа главного врача. Приказ издается не реже одного раза в два года, корректируется по мере необходимости.

    В лабораториях медорганизаций работу с ПБА могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским или биологическим образованием, прошедшие необходимую профессиональную подготовку.

    Лица, имеющие медицинские противопоказания к вакцинации, лечению специфическими препаратами, использованию средств индивидуальной защиты, к работам с ПБА не допускаются.

    Не реже 1 раза в год медицинский персонал, работающий с ПБА, должен проходить инструктаж по соблюдению требований биологической безопасности. Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и санитарки лаборатории также должны проходить вводные и периодические инструктажи по биологической безопасности.

    При приеме на работу сотрудников лаборатории направляют на предварительный медицинский осмотр для выявления противопоказаний с учетом специфики трудовой деятельности[1].

    Все сотрудники, которые привлекаются к работам с ПБА, должны быть привиты в соответствии с календарем профилактических прививок и календарем прививок по эпидемическим показаниям.

    К работе с паровыми стерилизаторами (автоклавами) могут быть допущены лица, обученные, аттестованные и имеющие удостоверение на право обслуживания сосудов, работающих под давлением.

    Организация работы комиссии по биологической безопасности

    Для контроля за соблюдением мер биологической безопасности при работе с ПБА в медорганизации создается специальная комиссия. В ее состав, как правило, включают заведующего лабораторией, врача-эпидемиолога или его помощника, инженера по охране труда и других заинтересованных специалистов.

    Задачи комиссии по биологической безопасности:

  • организация и проведение постоянного контроля за соблюдением регламентированного порядка обеспечения биологической безопасности лаборатории;
  • разработка комплекса мер по совершенствованию биологической безопасности;
  • организация и проведение мероприятий, направленных на предупреждение аварийных ситуаций при работе с ПБА и ликвидацию их последствий;
  • контроль за подготовленностью сотрудников к работе с ПБА и организация наблюдения за состоянием их здоровья.
  • Заседания комиссии проводятся не реже 2 раз в год. Решения комиссии доводятся до сведения руководителя медорганизации.

    [1] Объем и порядок проведения медосмотра определяются Приказом Минздравсоцразвития России от 12.04.2011 № 302н (в ред. от 06.02.2019) «Об утверждении перечней вредных и (или) опасных производственных факторов и работ, при выполнении которых проводятся обязательные предварительные и периодические медицинские осмотры (обследования), и порядка проведения обязательных предварительных и периодических медицинских осмотров (обследований) работников, занятых на тяжелых работах и на работах с вредными и (или) опасными условиями труда».

    Е. В. Дубель,
    зав. эпидемиологическим отделом — врач-эпидемиолог БУЗ ВО «Вологодская городская больница № 1»

    И. А. Лебедева,
    зав. клинико-диагностической лабораторией БУЗ ВО «Вологодский областной противотуберкулезный диспансер»

    admin